Dit is een type enzym dat reacties katalyseert (versnelt) waarbij overdrachten van fosfaatgroepen plaatsvinden, met name hexokinase werkt op de fosforylering van glucose om een nieuwe verbinding te vormen genaamd 'glucose-6-fosfaat' (omdat de fosforgroep bevindt zich op koolstof nummer 6 van glucose). In de biochemische reactie die de werking van hexokinase vereist, is het het proces van glycolyse, of de afbraak van glucose, specifiek in spieren en andere weefsels zoals hersenen, rode bloedcellen en onder andere, de afbraak van glucose resulteert in de productie van pyrodruivenzuur of pyruvaat; de omgekeerde reactie van glycolyse resulteert in de vorming van glucose uit niet- koolzuurhoudende verbindingen of glucogenogenese en vindt plaats op het niveau van de lever.
Dit enzym werd toen echter hexokinase genoemd vanwege de etymologische betekenis van het woord 'kinase' geeft aan dat het enzym fosforylering produceert (voegt een fosforgroep toe aan de reactie) en 'hexo' verwijst naar de reactie die gegeven in hexoses, dit zijn een groep koolhydraten of suikers die zijn samengesteld uit 6 koolstofatomen, binnen deze groep zijn onder andere glucose, fructose, mannose. Een van de essentiële chemische verbindingen voor de goede werking van hexokinase is magnesium, dit remt de negatieve ladingen van zuurstof of ATP en vergemakkelijkt zo de combinatie van de fosfaatgroep met hexose, daarom werkt het niet zonder de aanwezigheid van magnesium.
Hexokinase heeft een isoenzym (ze zijn verschillend maar vervullen dezelfde functie) dit wordt glucokinase genoemd, het verschil tussen de twee is de lokalisatieplaats, hexokinase komt voor in alle cellulaire weefsels die glucose nodig hebben als energiebron, terwijl dat glucokinase zich alleen in hepatocyten bevindt, dit zijn cellen die het leverweefsel vormen(lever). Beiden vervullen dezelfde functie, fosforyleren glucose zodat het niet uit de cel ontsnapt en het opsluit om het glycolyseproces uit te voeren, een ander belangrijk verschil tussen beide enzymen is de verbinding die zijn functie remt, hexokinase stopt met werken als het bezeten is glucose-6-fosfaat in hoge concentraties, terwijl glucokinase wordt geremd door grote hoeveelheden fructose-6-fosfaat.
